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CHO/dhFr-仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷
货号:BY-1298
品牌:乾思细胞
规格:T25瓶
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CHO/dhFr - 仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷简介
CHO/dhFr - 仓鼠卵巢细胞是中国仓鼠卵巢细胞(CHO)的特殊突变株,因其缺乏二氢叶酸还原酶(DHFR)活性而得名。DHFR 是叶酸代谢途径中的关键酶,负责催化二氢叶酸还原为四氢叶酸,后者参与 DNA、RNA 和蛋白质的合成。该细胞系由于 DHFR 基因缺陷,无法在不含次黄嘌呤和胸腺嘧啶的培养基中存活,这一特性使其成为基因工程和生物制药领域**价值的工具细胞。
从生物学特性来看,CHO/dhFr - 细胞保留了 CHO 细胞的基本形态与生长特性,呈上皮样贴壁生长,细胞形态多为多边形或不规则形,在适宜条件下增殖能力较强,倍增时间约为 18 - 24 小时,可稳定传代,适合大规模培养。但由于缺乏 DHFR,细胞生长依赖外源提供的核苷酸前体(次黄嘌呤和胸腺嘧啶)。
在基因工程应用中,CHO/dhFr - 细胞的 DHFR 缺陷特性成为筛选和扩增外源基因的有效手段。科研人员通常将编码 DHFR 的基因与目的基因共同构建到表达载体中,转入 CHO/dhFr - 细胞后,将细胞置于不含次黄嘌呤和胸腺嘧啶且含有甲氨蝶呤(MTX)的培养基中筛选。MTX 是 DHFR 的强抑制剂,普通细胞会因 MTX 抑制 DHFR 活性导致核苷酸合成受阻而死亡,而成功转入 DHFR 基因和目的基因的细胞则能够利用 MTX 抗性存活并大量增殖,从而实现对目的基因阳性克隆的高效筛选。同时,逐步提高 MTX 浓度,会促使细胞通过增加 DHFR 基因拷贝数来抵抗 MTX 抑制,由于目的基因与 DHFR 基因共表达,从而显著提高目的蛋白的表达水平。
在生物制药领域,CHO/dhFr - 细胞发挥着举足轻重的作用。全球众多上市的治疗性单克隆抗体、细胞因子、生长激素等生物药均采用该细胞系生产。其优势在于能够对表达的蛋白进行正确的折叠、糖基化等翻译后修饰,生产出的重组蛋白药物具有与天然蛋白相似的结构和功能,且**性高、免疫原性低。此外,在基础科研中,CHO/dhFr - 细胞也常用于研究基因表达调控机制、蛋白质功能及细胞信号通路等,为生命科学领域的探索提供了重要的细胞模型。
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