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AR42J 大鼠胰腺外分泌细胞简介

起源与背景

细胞特性

1. 形态与生长特性
   • 形态：贴壁生长，呈多边形或上皮样细胞形态，汇合时可形成铺路石样单层，具有典型的腺泡细胞特征（如胞质丰富、嗜碱性颗粒）。
   • 增殖能力：永生性细胞系，可在体外稳定传代，但增殖速度较正常原代细胞稍慢，需定期传代以维持活性（传代周期通常为 3~5 天，密度达 80%~90% 时传代）。
2. 功能特性
   • 外分泌功能模拟：虽为癌细胞系，但保留部分正常胰腺腺泡细胞的功能，如可合成和分泌消化酶（如淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶原等），但分泌能力低于原代腺泡细胞。
   • 激素响应性：对促胰液素（Secretin）、胆囊收缩素（CCK）等胃肠激素敏感，可通过相应受体激活细胞内信号通路（如 cAMP、Ca2?信号），调控酶分泌和细胞增殖。
   • 病理模型特性：在炎症因子（如 IL-1β、TNF-α）或化学刺激（如雨蛙素）作用下，可诱导类似急性胰腺炎的病理变化（如细胞水肿、炎症因子释放、腺泡细胞凋亡或坏死），因此常用于胰腺炎发病机制研究。

培养与保存

1. 培养条件
   • 培养基：常用含 10% 胎牛血清（FBS）的 Ham's F-12 培养基，或 DMEM/F12 混合培养基，添加 1% 青霉素 - 链霉素双抗。
   • 环境：37℃、5% CO?恒温培养箱，湿度 95% 以上，维持弱碱性 pH（7.2~7.4）。
   • 传代方法：胰酶 - EDTA 消化法（0.25% 胰酶），消化时间约 2~3 分钟，镜下观察细胞变圆后终止消化，离心收集细胞并重悬接种。
2. 冻存与复苏
   • 冻存液：含 10% DMSO、20% FBS 的培养基，细胞密度调整为 1×10?~5×10? cells/mL，程序降温后液氮保存。
   • 复苏要点：快速解冻（37℃水浴 1 分钟），轻柔离心去除冻存液，避免 DMSO 损伤细胞，接种后 24 小时更换新鲜培养基以去除死细胞。

应用领域

1. 胰腺外分泌功能研究
   • 分析消化酶（如淀粉酶）的合成、储存和分泌机制，探究激素（如 CCK）对腺泡细胞的调控通路。
   • 研究胰腺腺泡细胞极性、细胞间连接（如紧密连接、间隙连接）的分子基础。
2. 胰腺炎机制研究
   • 模拟急性胰腺炎的病理过程，分析炎症因子、氧化应激、钙稳态失衡等因素对腺泡细胞的损伤机制。
   • 筛选**药物或抗氧化剂，评估其对腺泡细胞凋亡、坏死的保护作用（如通过检测 LDH 释放、caspase 活性等指标）。
3. 胰腺癌相关研究
   • 虽非典型胰腺癌细胞系（更接近正常腺泡细胞恶变早期阶段），但可用于研究胰腺导管腺癌（PDAC）的早期转化事件，或与其他胰腺癌细胞系（如 Panc-1、BxPC-3）对比分析。
   • 探索化疗药物（如吉西他滨）对胰腺外分泌细胞的毒性作用及耐药机制。
4. 信号通路与分子机制研究
   • 常用于研究 Ca2?信号、MAPK 通路（如 ERK、JNK）、NF-κB 炎症通路在胰腺细胞中的功能，以及转录因子（如 NFAT、AP-1）的调控作用。

局限性与注意事项

• 功能局限性：作为永生化细胞系，其外分泌功能（如酶分泌量）及病理反应（如胰腺炎模型的严重程度）与原代腺泡细胞或体内模型存在差异，需结合动物实验验证。
• 批次差异：不同实验室保存的 AR42J 细胞可能因传代次数或培养条件不同，导致功能特性（如激素响应性）不一致，建议使用低代次细胞（<20 代）并定期验证。
• 污染风险：需警惕支原体污染（约 15% 的细胞系存在污染），建议定期进行支原体检测（如 PCR 法），并使用支原体清除剂（如 Mynox）处理。