2025小妹全国空降,全国高端商务伴游,如何寻找接私活的女生微信,附近学生24小时随叫随到手机号码
网站首页
关于我们
抗原和抗体
试剂盒
生化试剂
化学试剂
蛋白质
血清
细胞
ELISA系列
实验仪器耗材
产品展示
physitemp
Giotto Biotech
HaemoScan
Swant
Arbor Assays
Gemini Bio
?QuidelOrtho
PBL Assay Science
Verichem Laboratories
Eagle Manufacturing Company
销售品牌
销售品牌
代理品牌
试剂盒
代理
新闻资讯
资料下载
在线留言
联系我们
所在位置:
首页
>
产品列表
> 细胞
> 大鼠
NRK-52E大鼠肾细胞
货号:BY-1241
品牌:其它品牌
规格:T25瓶
目录价:
询价
商品详情
相关下载
NRK-52E 大鼠肾细胞详解
起源与背景
NRK-52E 细胞是
NRK(Normal Rat Kidney)细胞系的经典株系
,源自
正常大鼠肾脏近端肾小管上皮细胞
,通过
SV40 病毒永生化
技术建立。该细胞系由美国学者于 20 世纪 80 年代分离,因其保留了近端小管上皮的典型形态和功能特性,成为研究
肾小管生理、病理损伤及药物毒性
的常用体外模型,尤其适用于模拟糖尿病肾病、急性肾损伤(AKI)等疾病的细胞机制研究。
细胞特性
形态与生长特征
形态学
:贴壁生长时呈
鹅卵石样或多边形单层排列
,细胞边界清晰,细胞质丰富且透光性好,细胞核大而圆,位于细胞中央(显微镜下可见典型的上皮细胞铺路石样结构,图 1)。
生长动力学
:
倍增时间约
24-36 小时
,传代周期 3-4 天,建议使用
20 代以内
细胞以维持稳定表型。
密度达 80%-90% 时需传代,过度汇合可能导致细胞接触抑制,甚至出现去分化现象(如极性丢失、间质标志物表达增加)。
表型与功能标志物
上皮细胞特异性标记
:
高表达
细胞角蛋白 18(CK18)
、
E - 钙粘蛋白(E-Cadherin)
、紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin),免疫荧光染色可见细胞膜或细胞质呈阳性(图 2)。
功能性蛋白:钠 - 葡萄糖协同转运蛋白 2(SGLT2)、Na?/K?-ATP 酶(位于基底膜,维持离子梯度)、水通道蛋白 1(AQP1,参与水分重吸收)。
病理应激响应
:
高糖诱导损伤
:25 mM 葡萄糖处理可激活 PKC 通路,导致
活性氧(ROS)生成增加
、
TGF-β1 分泌升高
,进而诱导上皮 - 间质转化(EMT),表现为 α-SMA(间质标志物)表达上调、E-Cadherin 表达下降。
顺铂毒性模型
:通过顺铂(10-20 μM)处理可模拟 AKI,诱导细胞凋亡(Annexin V/PI 双染阳性率升高)和炎症因子(如 IL-6、MCP-1)释放。
体外功能验证模型
跨膜转运功能
:利用 Transwell 小室检测
跨膜电阻(TER)
(正常 TER 值约 500-800 Ω?cm2)和荧光标记物(如 FITC - 葡聚糖)的通透性,评估紧密连接完整性。
细胞外基质(ECM)合成
:在 TGF-β1(5 ng/mL)刺激下,可显著增加 **Ⅰ 型胶原、纤连蛋白(FN)** 的 mRNA 和蛋白表达,模拟肾小管间质纤维化过程。
培养与保存条件
基础培养方案
培养基
:经典配方为
DMEM/F12(1:1 混合)+10% 胎牛血清(FBS)+1% 双抗(青霉素 / 链霉素)
,部分实验为增强上皮特性可添加
胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒(ITS)复合物
(1×)。
培养环境
:37℃、5% CO?恒温培养箱,湿度≥95%,pH 7.2-7.4。
传代操作
:
消化:0.25% 胰酶 - EDTA 室温消化 30 秒 - 1 分钟,镜下观察细胞变圆、间隙增大时终止消化(避免过度消化导致细胞成团或损伤)。
传代比例:1:2-1:3(按细胞密度调整),接种密度建议
5×10? cells/cm2
。
冻存与复苏要点
冻存液
:90% FBS + 10% DMSO(或使用商业化细胞冻存液),细胞密度调整为
1×10?-3×10? cells/mL
,程序降温(-80℃过夜后转液氮)。
复苏技巧
:37℃水浴快速解冻(≤1 分钟),离心(800 rpm×5 分钟)去除冻存液后,接种于含 15% FBS 的培养基中,24 小时内更换培养液以清除死细胞。
应用领域与典型研究
糖尿病肾病(DN)机制研究
高糖 / AGEs 模型
:通过高葡萄糖(25 mM)或 AGE-BSA(100 μg/mL)处理细胞,研究
mTOR 通路激活
对 ECM 沉积的影响,或筛选 PPAR-γ 激动剂(如罗格列酮)对 EMT 的抑制作用。
氧化应激与炎症
:检测高糖条件下 NADPH 氧化酶(NOX4)表达及 NLRP3 炎症小体激活,探讨 Sirtuin 家族蛋白(如 SIRT1)的肾保护机制。
急性肾损伤(AKI)与药物毒性评估
顺铂 / 庆大霉素毒性模型
:通过剂量梯度实验(顺铂 5-20 μM)建立 AKI 细胞模型,检测
肾损伤分子 - 1(KIM-1)、NGAL
的分泌水平,或验证抗氧化剂(如 N - 乙酰半胱氨酸)的保护效应。
新型药物肾毒性筛选
:利用 CCK-8 法、LDH 释放实验评估候选药物对 NRK-52E 细胞的存活率影响,结合流式细胞术分析凋亡(Annexin V)和坏死(PI)比例。
肾小管上皮细胞生物学研究
EMT 与纤维化机制
:TGF-β1 诱导 EMT 模型中,研究 miRNA-21/PTEN 通路对细胞表型转化的调控,或探索间充质干细胞外泌体对 EMT 的逆转作用。
细胞极性与转运功能
:通过 RNA 干扰敲低 ZO-1,观察紧密连接破坏后溶质转运异常,或研究 Wnt/β-catenin 通路对上皮极性的维持作用。
肾脏修复与再生研究
生长因子促进修复
:探讨肝细胞生长因子(HGF)或表皮生长因子(EGF)对划痕**实验中细胞迁移的促进作用,或验证低氧预处理(1% O?)对细胞抗损伤能力的增强效应。
表观遗传调控
:研究组蛋白去乙酰化酶(HDAC6)抑制剂对 NRK-52E 细胞线粒体功能的保护作用,或分析长链非编码 RNA(如 lncRNA MALAT1)在 AKI 中的表达变化及机制。
局限性与注意事项
模型局限性
永生化带来的功能偏差
:与原代近端小管细胞相比,NRK-52E 细胞的
刷状缘酶(如碱性磷酸酶、γ- 谷氨酰转肽酶)活性较低
,部分药物代谢酶(如 CYP450)表达缺失,复杂代谢研究需结合原代细胞或肝 - 肾共培养模型。
株系特异性
:不同实验室保存的 NRK-52E 细胞可能存在微小遗传差异,建议通过
短串联重复序列(STR)鉴定
确认细胞身份,避免交叉污染(如与成纤维细胞株混淆)。
实验设计注意事项
血清饥饿处理
:在刺激实验(如细胞因子、药物处理)前,建议用
无血清培养基饥饿 12-24 小时
,以排除血清中生长因子的干扰(如 EGF 可能激活 MAPK 通路)。
多重模型验证
:关键机制研究需结合
体内模型
(如大鼠顺铂肾损伤模型)或
类器官模型
(如肾小管类器官),以弥补体外模型与真实病理环境的差异。
质量控制
污染检测
:定期通过支原体检测试剂盒(如 qPCR 法)排除污染,避免真菌、细菌或交叉污染导致实验结果不可靠。
表型稳定性
:传代超过 20 代后,部分细胞可能出现 EMT 样表型(如 α-SMA 基础表达升高),建议冻存低代次细胞(≤10 代)并定期复苏使用。
总结
NRK-52E 细胞作为经典的肾小管上皮细胞模型,凭借其
培养便捷、表型稳定、应激响应明确
的优势,广泛应用于肾脏疾病机制、药物毒性及细胞生物学研究。使用时需结合实验目的充分评估模型局限性,并通过多维度验证(分子标志物、功能实验、体内外关联)确保结论的可靠性。随着单细胞测序和类器官技术的发展,NRK-52E 细胞仍将在肾脏研究中发挥重要的基础支撑作用。
样本/手册/说明书/CAD/软件
文件大小
发布时间
官方采购 售后保障
服务完善 质量保证
及时配送 售后无忧
微信下单 便捷时尚
关于我们
产品展示
新闻资讯
联系我们
公司简介
工作机会
发展历程
抗原和抗体
试剂盒
生化试剂
化学试剂
蛋白质
血清
细胞
ELISA系列
实验仪器耗材
更多>>
销售品牌
代理品牌
试剂盒
代理
国内免费技术支持:
021-34556080
邮箱:info@biobaiye.com
业务咨询:18121041631(
微信同号
)
业务QQ:3922903794
Copyright@ 2003-2025
上海乾思生物科技有限公司
版权所有
本公司网站所展示销售的产品仅供科研!
沪ICP备2023041625号-2
沽源县jx8914
|
交口县wul411
|
宁国市z8l492
|
肇东市byz212
|
乌兰浩特市99z869
|
咸丰县mll929
|
德州市7ux628
|
黄冈市hs7610
|
兖州市sh7257
|
曲麻莱县jdb436
|
香格里拉县i7n631
|
德昌县nhr465
|
纳雍县7lh260
|
上杭县cb8758
|
城步btr475
|
合作市h8h270
|
儋州市abs854